Virkningen af pyrrolidons pH-værdi og temperatur på vandig PVP-opløsning spiller en rolle i cellefrøbevaring. Korrekt drift og passende fryseforhold kan reducere ændringen eller tabet af cellekarakteristika. Ikke-tværbundet PVP-opløsning har ingen speciel tixotropi, medmindre den er tixotrop i høj koncentration og viser en meget kort afslapningstid. Erfaring med cellefrysning: At vælge det rigtige fryseværktøj er den bedste måde. Cellefrysning er en teknologi, der opbevarer celler i et miljø med lav temperatur, reducerer cellemetabolisme og opnår langtidslagring. (Pyrrolidon) I de fleste cellelinjer er PVP's fortykkelsesevne tæt forbundet med dets relative molekylmasse. Under givne koncentrationsbetingelser, jo større den relative molekylmasse er, jo større er dens viskositet. Celler vil fortsætte med at akkumulere og ændre sig med aldring og evolution, hvilket forårsager "kulturdrift" af fænotype og genotype. Korrekt og vellykket frysning spiller en vigtig rolle i den langsigtede anvendelse af celler.
Korrekt dyrkning og skånsom celleopsamling, før frysning, bør celler derfor opretholde den bedste væksttilstand under frysningsprocessen (i den logaritmiske eller eksponentielle fase). Ideelt set bør dyrkningsmediet udskiftes 24 timer før høst. Det anbefales at kontrollere kulturen for mikrobielle kontaminanter, især mycoplasma, for at sikre, at cellerne ikke er kontamineret. Under celleindsamlingsprocessen skal den eksperimentelle operation være så skånsom som muligt for at undgå celleskade. (Pyrrolidon) Passende kryobeskyttelsesmiddel. På nuværende tidspunkt er den almindeligt anvendte teknologi til cellefrysning flydende nitrogen kryokonservering, som hovedsageligt bruger langsom nedfrysningsmetode med passende mængde beskyttelsesmiddel til at fryse celler og reducere beskadigelse af celler under fryseprocessen. Hvis cellerne er direkte frosne uden beskyttelsesmiddel, vil vandet i og uden for cellerne hurtigt danne iskrystaller, hvilket forårsager en række uønskede reaktioner.
Polyvinylpyrrolidon, ethylenglycol, methanol og methylacetamid er alle kryobeskyttelsesmidler. Dimethylsulfoxid (DMSO) og glycerol er almindelige i cellekryokonservering. Disse to stoffer har lav molekylvægt, høj opløselighed og kan let trænge ind i celler. De kan sænke frysepunktet og øge permeabiliteten af cellemembraner for vand. Nøglen ligger i cellens natur. (Pyrrolidon) DMSO har normalt en koncentration på 5-10 % (v/v), og den optimale koncentration varierer med forskellige cellelinjer. Den endelige koncentration af glycerol i frysemediet er 5-15%. På samme måde afhænger den optimale koncentration af cellelinjen. For at øge overlevelsesraten for celler, der er svære at bevare, kan man vælge at øge serumkoncentrationen i konserveringsopløsningen under kryokonservering. Hvis du ønsker at fryse celler hurtigere og mere stabilt, vil cellefryseopløsning være et godt valg. Der kræves ingen forberedelse. Bare tilsæt en passende mængde fryseopløsning til cellerne. Operationen er enkel, og du kan have celler med høj levedygtighed.
